Le complexe V de la chaine de respiration mitochondriale est essentiel à la production d’ATP. ATP5A, sous-unité de ce complexe, est une protéine clé pour le maintien de la morphologie et de l’ultrastructure mitochondriale, et pour le fonctionnement de la chaîne respiratoire. Nous la retrouvons localisée dans les membranes des crêtes avec d’autres protéines comme MIC60 (site de contact mitochondriale et système d’organisation des crêtes, sous unité 60) et PHB2 (Prohibitin-2). Etudier leur distribution spatiale permettrait de nous donner des informations sur les possibles interactions entre ces protéines, et d’obtenir une cartographie des crêtes mitochondriales avec une résolution spatiale jamais atteinte. La question posée est la suivante : Sommes-nous capables d’étudier cette distribution spatiale dans un sous compartiment restreint avec les outils de microscopie actuels ? Pour répondre à cette problématique nous allons utiliser la microscopie de super résolution par dSTORM (Direct Stochastic Optical Reconstruction Microscopy) en modalité deux couleurs (2c-dSTORM). Grâce à cet outil, nous pourrons visualiser les colocalisations entre différentes protéines avec une résolution sous-mitochondriale supérieure aux techniques de microscopie de fluorescence conventionnelles. Ainsi, cette technique nous permettra de séparer des protéines qui se trouvent à une distance d’environ 10 nm. Nous analyserons la colocalisation entre deux couples de protéines : ATP5A et MIC60, ATP5A et PHB2. Nous les comparerons entre elles et avec un couple contrôle, ATP5A et TOMM20, où la colocalisation sera très limitée. Nous aborderons la problématique biologique et les différentes étapes de préparation des échantillons spécifiques à l’imagerie mitochondriale. Puis, nous effectuerons l’acquisition d’images et, à la fin, nous présenterons des perspectives pour l’analyse de colocalisation avec la solution GcoPS.