Les cellules sont des unités fonctionnelles hautement complexe constituée de différents organelles assurant des fonctions spécialisées (métabolisme énergétique, production de protéine, transport, dégradation, …). Ces divers compartiments cellulaires ont une répartition propre en fonction du type cellulaire rencontré (cellules épithéliales, immunitaires ou neuronales) ce qui nous donne cette grande variété de distribution au sein des cellules. La microscopie à fluorescence a révolutionné l’analyse de la composition intracellulaire. Cela a notamment permis d’étudier la localisation et la dynamique des organelles de façon spécifique mais aussi de mettre en évidence la communication entres ces petits compartiments. La microscopie confocale, grâce à l’illumination laser en un plan focal, donne accès à une image plus nette avec une résolution de l’ordre de 200 à 250 nm de résolution. Cependant, l’étude de ces petits organelles nécessitent de s’affranchir de cette barrière de diffraction et d’aller encore plus loin dans la résolution. En effet certaines vésicules ou compartiments font de l’ordre de 50 nm à 200 nm de diamètre. Certaines observations ont été rendu possibles récemment grâce aux techniques de Super-résolution (SIM, STED et STORM). Nous proposons ici de présenter les avantages de la microscopie STED qui permet de descendre jusqu’à une résolution de 40nm à 80nm. Dans cet atelier les participants pourront observer en microscopie confocale et en microscopie STED, la communication entres différents organelles (Réticulum endoplasmique-appareil de Golgi puis réticulum endoplasmique –Endolysosomes) dans différents type cellulaire. Afin de présenter les spécificités liées à la polarité cellulaire, nous présenterons deux types cellulaires à géométrie très différentes : les cellules épithéliales de type HeLa et les neurones d’hippocampe, connus pour avoir de long prolongements où le trafic cellulaire intense permet des transports rapides sur de longues distances.