A078 - STED-FLIM, apport du temps de vie de fluorescence dans les techniques de STED au niveau multi-couleur, 3D et vivant

Pierre Bourdoncle (pierre.bourdoncle@inserm.fr)
Julie Lesieur (julie.lesieur@inserm.fr)

La technique de FLIM (Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy) mesure le temps de vie des molécules fluorescentes, permettant d’obtenir des informations sur l'environnement des molécules et sur les interactions entre elles. La technique STED (Stimulated Emission Depletion) permet de réduire la taille de la région d’émission de fluorescence à l’aide d’un laser de déplétion, ce qui permet d'obtenir une meilleure résolution spatiale. Cette résolution étant directement liée à la puissance de ce laser, il est très difficile d’envisager l’étude in-vivo en STED. En couplant le FLIM au STED, on peut ainsi réduire la puissance du laser de déplétion et utiliser cette technique de super-résolution sur des cellules vivantes. En résumé, FLIM et STED sont des techniques complémentaires qui permettent d'obtenir des informations sur les molécules fluorescentes à la fois spatialement et temporellement. En utilisant de faibles puissances lasers le STED-FLIM permet l’approche super-résolution sur des cellules vivantes en multi-couleurs et en 3D.